Técnicas Moleculares de Secuenciación

Secuenciación de Ascaris Lumbricoides

Se desarrolló un método de extracción de ADN modificado basado en los métodos de Fenol / Cloroformo y Qiagen. Para las cinco muestras de la línea germinal basados ​​en cox-1, el ADN se extrajo del útero, el oviducto o el ovario de los gusanos. Se secuenciaron muestras de ADN de A. lumbricoides utilizando la secuenciación de extremos emparejados de lectura corta de Illumina HiSeq 2500. El ADN se cuantificó mediante UV Spec y Picogreen.

Referencia Bibliográfica:

-Molecular evidence of hybridization between pig and human Ascaris indicates an interbred species complex infecting humans [Internet]. eLife. 2020 [cited 31 January 2021]. Available from: https://elifesciences.org/articles/61562#abstract

-Velázquez L, Aragón Martínez M. [Internet]. Www2.inecc.gob.mx. 2021 [cited 31 January 2021]. Available from: http://www2.inecc.gob.mx/publicaciones2/libros/710/extraccion.pdf

Prueba PCR para Ascaris Lumbricoides

 

PCR en tiempo real Ascaridiasis

La PCR en tiempo real es una variante de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultáneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificación de ácido desoxirribonucleico (ADN), para una mejor detección basada en PCR en tiempo real de la infección por Ascaris se relizaron pruebas de huevos en heces humanas y del parásito, se amplificaron y secuenciaron ADN ribosómico nuclear (regiones ITS1 e ITS2) y ADN mitocondrial (gen cox1) presentando una especificidad cercana al 100% y una sensibilidad del 80%.

Referencia Bibliográfica:

-Sadaow, L., Sanpool, O., Phosuk, I., Rodpai, R., Thanchomnang, T., Wijit, A., … Intapan, P. M. (2018). Molecular identification of Ascaris lumbricoides and Ascaris suum recovered from humans and pigs in Thailand, Lao PDR, and Myanmar. Parasitology Research, 117(8), 2427–2436. doi:10.1007/s00436-018-5931-6 Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29860571/

Alteraciones de la Epigenómica

Alteraciones de la Epigenómica por Ascaris Lumbricoides

Se han identificado más de veinte mecanismos epigenéticos, los cuales son importantísimos en la regulación de la transcripción y, por tanto, en la expresión génica. Entre las alteraciones en la epigenómica incluyen mecanismos de metilación del ADN. Algunos investigadores proponen que el mecanismo está basado en la inactivación epigenética de genes represivos en las células epiteliales gástricas. Un ejemplo es el gen llamado Reprimo, que interviene en el ciclo celular y que se encuentra frecuentemente metilado en la sangre de pacientes con enfermedades intestinales.

Referencias Bibliográficas:

- Burón Hernández J, Suárez Formigo G. Mecanismos epigenéticos en la plasticidad y flexibilidad de los linfocitos T CD4 [Internet]. Scielo.sld.cu. 2018 [cited 17 January 2021]. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-02892018000100005

-Melero Alarte V. Perfil epigenético de las enfermedades inflamatorias intestinales: influencia de la metilación del ADN en la fase inicial y en la evolución de estas enfermedades [Internet]. Riunet.upv.es. 2020 [cited 17 January 2021]. Available from: https://riunet.upv.es/handle/10251/150121

Ascaridiasis

 Alteración en la Traducción

Los helmintos intestinales como el áscaris lumbricoides el IFN-γ estimula a los macrófagos para que liberen TNF, una citocina que afecta significativamente la formación de granulomas y la propagación de la infección. Los macrófagos, neutrófilos y eosinófilos, las proteínas granulares como la proteínas básica mayor tipo 1 y tipo 2 (MBP1 y MBP2), son muy tóxicas para los helmintos, actúa mediante la interrupción de la membrana celular y actividad enzimática, la proteínas catiónica eosinófila provoca una exfoliación y lesión de células epiteliales.

Fuente Bibliográfica:

-Abdalla Santos J, Bührer-Sékula S, Cardoso Melo G, Cordeiro-Santos M, Diniz Pimentel J, Gomes-Silva A. Ascaris lumbricoides coinfection reduces tissue damage by decreasing IL-6 levels without altering clinical evolution of pulmonary tuberculosis or Th1/Th2/Th17 cytokine profile [Internet]. Scielo. 2019 [cited 10 January 2021]. Available from: https://www.scielo.br/scielo.php?pid=S0037-86822019000100347&script=sci_arttext

Alteración en la transcripción Ascaridiasis

 Alteración en la transcripción

La transcripción es el proceso por el cuál la información del ADN se transfiere al ARN, el Ascaris Lumbricoides secreta enzimas que actúan sobre los factores de transcripción NFkB y TNF-α e inhiben su unión al ADN, al inhibirse también bloquea a dos proteinas NFkb (ReIA Y p50). ReIA es escencial para secretar moléculas de adhesión que median el reclutamiento de neutrófilos y p50 limita su expresión.

Fuente Bibliográfica:

1. Zárate Peñata E, Marrugo Cano J. Inhibidores del NF-κB en la dieta y su papel en las enfermedades alérgicas. Barranquilla: Scielo; 2017. Disponible en: http://www.scielo.org.co/pdf/sun/v33n3/2011-7531-sun-33-03-00464.pdf